روش نمونه گیری :
- خون تام
- خون از پاشنه پا ( جهت نوزادان)
1- مرحله اول تهیه همولیزات از خون تام :
- خون کامل تازه، حاوی ضد انعقاد EDTA یا هپارین باید مورد مصرف قرار بگیرد. از یخ زدن نمونه با نگهداری همولیزات خودداری نمایید.در صورت نیاز به ذخیره نمونه بیمار، میتوان آنرا بمدت ۳ روز در ۴ درجه نگهداری نمود.
- ابتدا درون یک لوله همولیز یک سی سی آب مقطر افزوده .
- به آن ۲۰ لاندا از خون کامل افزوده.
- اجازه دهید تا کاملا خون لیز شود .
- در صورت پایین و با بالا بودن میزان شروین نمونه بیمار از ۱۵ گرم درصد، باید طبق فرمول زیر غلظت همولیزات تنظیم گردد.
- در صورت تنظیم نبودن غلظت همولیزات زمان تغییر رنگ ازمایش بتاخیر افتاده کمبود کاذب نشان خواهد داد.
مثال: اگر هموگلوبین بیماری ۱۰ میلی گرم در صد باشد ، ضریب 0.3 را بر عدد ۱۰ تقسیم نموده. که عدد 0.03 بدست می آید. در نتیجه باید مقدار 0.03 سی سی و یا 30 لاندا از خون کامل بیمار را به لوله حاوی یک سی سی آب مقطر اضافه نمایید. تا همولیزات با غلظت مناسب جهت انجام تست فراهم گردد. ضریب 0.3 تقسیم بر هموگلوبین بیمار = میزان خونی که باید به یک سی سی آب مقطر افزوده شود.
0.3 : HB
2) تهیه همولیزات از خون پاشنه پا ( جهت نوزادان):
- جهت تهیه خون از پاشنه پای نوزاد از کاغذ صافی استفاده نمایید. (با ضخامت ۲-۱ میلیمتر)
- کاغذ صافی را به قطره خون نزدیک کنید تا خون کاملا جذب شود.
- سپس چند لکه خون تهیه نموده. کاغذ را بصورت افقی بر روی پایه ای قرار دهید. بطوریکه لکه خونی در تماس با اشیاء، نور خورشید، حرارت و آلودگی نباشد.
- پس از جذب کامل لکه خون و قبل از یک ساعت کاغذ صافی را پانچ نموده (دیسک به قطر ۶-۵ میلی متر). از آن دیسک ها همولیزات تهیه نمایید.
- تهیه همولیزات باید با در نظر گرفتن میزان هموگلوبین بیمار انجام شود. بطوریکه اگر هموگلوبین بالاتر از ۱۵ باشد از یک دیسک خونی استفاده شود. همچنین اگر بین ۱۵ – ۱۰ باشد از دو دیسک خونی مصرف کنید. همینطور اگر کمتر از ۱۰ گرم درصد باشد باید از سه دیسک خونی استفاده شود تا همولیزات مناسبی تهیه گردد.
- درون یک لوله آزمایش 0.5 سی سی آب مقطر افزوده . براساس میزان هموگلوبین یک تا سه دیسک خونی قرار داده تا هموگلوبین آزاد و یکنواخت شود. توجه شود به علت جذب آب مقطر توسط دیسک های خونی بهتر است محتویات لوله تست را به لوله همولیز اضافه نمایید. و زمان را یادداشت نمایید. افرودن روغن معدنی و بستن درب لوله با کاغذ پارافین الزامیست.
هشدار :
توجه نمایید اگر همولیزات غلظت مناسب را نداشته باشد تغییر رنگ در لوله تست دیرتر اتفاق میافتد. همچنین جواب آزمایش نادرست خواهد بود.
