توضیحات
محیط کشت DNAse Agar چیست؟
محیط کشت میکروبی DNAse Agar، یک محیط کشت جامد و افتراقی است. DNase (دزوکسی ریبونوکلئاز) یک آزمایش بیوشیمیایی است که برای تمایز موجودات زنده بر اساس توانایی آنها در تولید آنزیم DNase بکار می رود.
به منظور تشخیص باکتری های مولد آنزیم DNAse مانند استافيلوكوك هاي بيماري زا و سراشیا بکار می رود. DNase آنزیمیست که توسط تمام نژاد های استافیلوکوک اورئوس ساخته می شود.
اما فقط 25 درصد از نژاد های استافیلوکوک کواگولاز منفی می توانند این آنزیم را تولید کنند. آنزیم DNase در برابر حرارت مقاوم است و آنزیمی خارج سلولی محسوب می شود. این آنزیم DNA را به واحد های کوچکتری به نام نوکلئوتید تجزیه می کند و نوع باکتری شناسایی می شود.
اولین بار جفری، هالتمن و جوز DNA را در یک محیط کشت عمومی با آگار ترکیب کردند. در سال 1958 دی سالو ارتباطی بین کواگولاز و فعالیت DNAse دید. در سال 1969 اسمیت و همکارانش فرمولاسیون را با اضافه کردن تولوئیدن و کریستال ویوله تغییر دادند.
ویژگی ها :
- توانایی حمله به پیوندهای DNA و شکستن آنها
- نوعی آنزیم خارج سلولی
- مقاوم به گرما و حرارت
کاربردهای محیط کشت تست Dnase آگار :
- برای تعیین و شناسایی توانایی یک ارگانیسم در تولید آنزیم DNase
- شناسایی باکتری استافيلوكوك اوروئوس از سایر استافیلوکوک ها
- تفكيك و تشخيص گونه سراشياي بدون پيگمان (امکان دارد که به اشتباه بعنوان گونه انتروباكتر و كلبسيلا تشخيص داده شود)
- بررسی عملکرد آنزیم دزوکسی ریبونوکلئاز باکتری و قارچ ها
ترکیبات محیط کشت DNAse Agar :
- تریپتون
- پپتون سویا
- دئوکسی ریبونوکلئیک اسید
- سدیم کلرید
- باکتریولوجیکال آگار
طرز تهیه محیط کشت DNAse Agar :
- 42 گرم از پودر را به یک لیتر آب مقطر یا دیونیزه خالص اضافه می کنیم.
- بر روی حرارت هم می زنیم تا به جوش بیاید و محیط کاملا حل شود.
- با اتوکلاو کردن محیط حل شده در فشار 121 درجه سانتیگرادبه مدت 15 دقیقه استریل می کنیم.
- سپس تا دمای حدود 40-45 درجه سانتیگراد سرد می کنیم.
- محیط را در صفحات استریل پتری دیش می ریزیم.
- در صورت افزودن نشانگرها، قبل از استریل، 0.1 گرم تولویدین O یا متیل سبز به محیط اضافه می کنیم.
اساس آزمايش:
اگر ارگانیسم دارای آنزيم دزوکسی ریبونوکلئاز باشد؛ اسيدنوكلئيك را هيدروليز مي کند. كه با استفاده از معرف HCL و ايجاد هاله شفاف در اطراف محل رشد باكتري مي توان شناسایی کرد. محیط مناسب برای برداشتن کلنی پلیت های LEMB Agar یا Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood حاوی ارگانیسم مورد نظر می باشد.
ويژگي هاي آزمايش:
- حساسيت: ۹۹% استافيلوكوك هاي كواگولاز مثبت، DNase مثبت نيز هستند.
- اختصاصيت:۲۰% استافيلوكوك هاي كواگولاز منفي، DNase مثبت هستند.
DNase Test Agar که اسيد كلريدريك يک نرمال روی آن ريخته شده است :
- مثبت: فوراً هاله هاي شفاف كاملاً مشخصي اطراف كلني يا محل تلقيح را در محيط كشت احاطه مي كنند.
- منفي: اطراف كلني ها يا محل تلقيح شفاف نمي شود.
DNase Test Agar که تولوئيدين بلو ۱/۰% روی آن ريخته شده است :
- مثبت: هاله هاي شفاف قرمز صورتي، اطراف كلني يا محل تلقيح را احاطه مي كنند. محيط در جايي كه DNA باقي مانده باشد آبي مي شود.
- منفي: هاله هاي كدر قرمز صورتي اطراف كلني يا محل تلقيح را احاطه مي كنند.
پس از انكوباسيون روي پليت هايDNase Test Agar With Toluidine Blue ، معرف ريخته نمي شود و مستقيماً بررسي مي گردد.
تداخلات:
ممكن است بعضي از سويه هاي استافيلوكوك روي DNase Test Medium with Toluidine Blue مهار شوند. / پروتئوس ولگاريس، سودوموناس آئروژينوزا و آئروموناس، واكنش هاي مثبت زيادي براي توليد DNase نشان مي دهند.
پیشنهاد بررسی: لوله وکیوم CBC K2, K3 لبویر – لوله لخته کلات بدون ژل(Clot Activator) لبویر – لوله وکیوم لخته ژل دار لبویر
برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی محیط DNAse آگار میرمدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.