توضیحات
معرف اوره 40%
معرف اوره 40% به عنوان معرف در محیط کشت اوره آز در آزمایشگاه استفاده میشود.
اوره یا کاربامید یک ترکیب آلی سخت و بی رنگ است که دارای دو گروه آمین اتصال یافته به یک گروه کربونیل است. اوره در متابولیسم ترکیبات حاوی نیتروژن در بدن حیوانات نقش مهمی ایفا می کند. اوره در بدن بسیاری از موجودات زنده، به عنوان قسمتی از سیکل یا چرخه اوره، از اکسیداسیون اسیدهای آمینه یا آمونیاک تولید میشود. تولید اوره در کبد اتفاق میافتد و توسط ان استیل گلوتامات تنظیم میشود. اوره به شکل محلول در خون یافت میشود . و توسط کلیهها به عنوان جزئی از ادرار دفع میگردد.
بیش از 90% تولید اوره در دنیا، به منظور استفاده به عنوان کودهای شیمیایی حاوی نیتروژن است. در کاربردهای عمومی، اوره دارای بالاترین مقدار ازت در میان تمامی کودهای جامد نیتروژنی می باشد. در صنایع شیمیایی اوره ماده اولیه برای تولید بسیاری از ترکیبات شیمیایی مهم است.
خصوصیات معرف اوره 40% آزمایشگاهی
- اوره نه خاصیت اسیدی دارد و نه خاصیت قلیایی
- این ترکیب به شدت محلول در آب است.
- و تقریباً غیرسمی می باشد.
آنزیم اوره آز
برخی باکتری های آنزیمی به نام اوره آز (urease) تولید می کنند که قادر است ترکیبات آمیدی نظیر اوره را تجزیه نموده و آن را به آمونیاک، دی اکسید کربن و آب هيدروليز کند.در خانواده انتروباکتریاسه از میان باکتری های لاکتوز منفی تعدادی از آنها از جمله گونههاي پروتئوس، كلبسيلا، برخي از گونههاي سيتروباكتر، برخي از گونههاي هموفيلوس، مخمر كريپتوكوكوس نئوفورمانس و چندين باكتري و قارچ ديگر به دلیل فعالیت اوره آز (Urease Activity) از باکتری های دیگر این گروه نظیر سالمونلا و شیگلا قابل افتراق هستند. فعالیت اوره آز باکتری ها را می توان با کشت باکتری در محیط حاوی اوره و با کمک معرف فنل رد بررسی نمود.
اين آزمايش را ميتوان جهت غربالگري كلنيهاي لاكتوز منفي كه در نتيجه كشت مدفوع بر روي محيطهاي افتراقي رشد نمودهاند استفاده كرد. بايد توجه نمود كه يرسينيا انتروكوليتيكا كه يک پاتوژن مدفوعی است اورهآز مثبت ميباشد.به دنبال هیدرولیز اوره و تجمع آمونیاک PH محیط قلیایی می شود. بالا رفتن PH موجب تغییر رنگ معرف می شود.محصول نهائي قليائي سبب تغيير رنگ معرف فنل رد (Phenol red) از زرد به صورتي يا قرمز ميشود.
عدم مشاهده رنگ صورتی پررنگ یا ارغوانی نشانه منفی شدن تست اوره آز است. معرفهاي تجاري جهت انجام آزمايش اورهآز سريع در دسترس بوده و به صورت ديسك يا سوابهاي آغشته به معرف ميباشند. سواب را به كلني آغشته نموده و تغيير رنگ آن نشانه واكنش مثبت ميباشد.
روش انجام آزمایش
برای انجام تست اوره از از Urea Broth استفاده می شود. باکتری مورد آزمایش در شرایط استریل به محیط کشت مایع تلقیح شده و به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد نگهداری می شود. سپس لوله های کشت از نظر هیدرولیز اوره مورد بررسی قرار می گیرند.
روش تهیه آبگوشت اوره
تركيبات زیر را با هم مخلوط نموده و در لولههاي در پيچدار كوچک يا لولههای در پيچدار بوروسيليكات در مقادير 5/0 ميلي ليتر تقسيم می کنیم. اين معرف به مدت 6 ماه پايدار ميماند.
- عصاره مخمر 1/0 گرم
- مونوپتاسيم فسفات 091/0 گرم
- دي سديم فسفات 095/0 گرم
- اوره 20 گرم
- فنل رد 01/0 گرم
- آب مقطر 1000 ميلي ليتر
مقدار زيادي از ارگانيسم را به لوله حاوي آبگوشت اوره تلقيح می کنیم. لوله را در 35 درجه سانتيگراد انكوبه نموده و به مدت 15، 30، 60 دقيقه تا چهار ساعت از نظر تغيير رنگ به صورتي يا قرمز مشاهده نمائيد.
نتیجه
ارگانيسمهاي اورهآز مثبت (گونههای پروتئوس) موجب تغيير رنگ به رنگ صورتي روشن يا قرمز ميشوند. اما ارگانيسمهاي اورهآز منفي (اشريشيا كلای) تغيير رنگ را ايجاد نمينمايند.
نکات مهم در حین انجام آزمایش
- پروتئوس میرابیلیس یکی از عوامل مهم عفونت ادراری در انسان می باشد.
- تست اوره آز جهت شناسایی گونه های مهمی نظیر کورینه باکتریوم اوره آلیتیکوم، هلیکوباکترپیلوری، تشخیص مخمر های کپسول دار و به عنوان یک تست اضافی برای تشخیص بعضی کوکوباسیل های گرم منفی به کار می رود.
- تعدادی از باکتری اوره را با تاٴخیر هیدرولیز می کنند و برای بررسی واکنش تاٴخیری این باکتری ها، دوره انکوباسیون بیش از ۴۸ ساعت مورد نیاز است.
- در روش براث بافرهائي به كار رفتهاند كه تغييرات pH را كنترل نموده و واكنش را سرعت ميبخشند.
شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش مواد شیمیایی صنعتی و آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش معرف اوره 40% میر مدیا با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد.
برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی معرف اوره 40% میر مدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.
بررسی پیشنهاد : عصاره مخمر آگار – XLD آگار – ویولت رد بایل گلوکز آگار – محیط VRB آگار – محیط کشت اوره (پایه) آگار – BHI آگار کوندا – آگاروس E کوندا – آلکالن پپتون واتر کوندا – محیط کشت تایو – کیت رنگ آمیزی گرم – کیت رنگ آمیزی زیل نلسون
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.