گروههای خونی نادر، مانند گروه O بمبئی (Oh) یا زیرگروههای ضعیف ABO مانند A3، Ax یا B ضعیف چالشهای منحصربهفردی را در آزمایشگاههای هماتولوژی ایجاد میکنند. این گروهها به دلیل بیان کم یا غیرمعمول آنتیژنهای سطحی گلبولهای قرمز، اغلب با روشهای استاندارد تایپینگ به سادگی شناسایی نمیشوند. آنتیبادیهای ضد A و ضد B، که بهعنوان معرفهای اصلی در تایپینگ گروه خونی ABO استفاده میشوند، نقش حیاتی در تشخیص این موارد دارند. این آنتیبادیها، بهویژه در قالب مونوکلونال، باید حساسیت و اختصاصیت کافی برای شناسایی آنتیژنهای ضعیف یا غیرمعمول داشته باشند، بدون اینکه نتایج کاذب تولید کنند. این مقاله به بررسی نقش این آنتیبادیها در شناسایی گروههای خونی نادر میپردازد.
پارس پیوند، مشاور شما در تامین مواد مصرفی آزمایشگاه
برای خرید انواع کیت های تشخیصی گروه خون با مشاوران ما در تماس باشید.
راه های تماس با ما:
- شماره تلفن شرکت:021-40660490-5
- داخلی: 1053، 1055، 1056، 1058
- شماره های واتساپ: 09101701080, 09103146893, 09103147287, 09036641890
دایرکت اینستاگرام: @parspeyvand
گروههای خونی نادر و اهمیت تشخیص آنها
سیستم ABO بر اساس حضور یا عدم حضور آنتیژنهای A، B و H روی سطح گلبولهای قرمز تعریف میشود. در گروههای خونی رایج A، B، AB و O، این آنتیژنها بهوضوح بیان میشوند و با آنتیبادیهای ضد A و ضد B بهراحتی شناسایی میشوند. با این حال، گروههای خونی نادر مانند بمبئی (Oh) فاقد آنتیژن H هستند، که پایه بیوشیمیایی برای آنتیژنهای A و B است. در نتیجه، این افراد ممکن است به اشتباه بهعنوان گروه O تشخیص داده شوند، مگر اینکه تستهای تکمیلی انجام شود. زیرگروههای ضعیف مانند A3، Ax یا B ضعیف نیز به دلیل بیان کم آنتیژنها یا تغییرات ساختاری، تشخیص دشواری دارند. شناسایی دقیق این گروهها برای انتقال خون ایمن و مدیریت شرایط بالینی مانند بارداری یا بیماریهای همولیتیک ضروری است.
ویژگیهای آنتیبادیهای ضد A و B
آنتیبادیهای ضد A و ضد B که در آزمایشگاهها استفاده میشوند، معمولاً مونوکلونال هستند و از سلولهای هیبریدوما تولید میشوند. این آنتیبادیها به اپیتوپهای خاصی روی آنتیژنهای A و B متصل میشوند و واکنش آگلوتیناسیون را در حضور آنتیژن هدف ایجاد میکنند. اختصاصیت آنها به این معناست که آنتی A فقط با آنتیژن A و آنتی B فقط با آنتیژن B واکنش میدهد، اما حساسیت آنها باید به اندازهای باشد که واریانتهای ضعیف را نیز تشخیص دهند. برای مثال، آنتیژن A در زیرگروه A2 کمتر از گروه A1 بیان میشود و نیازمند آنتیبادیهایی با تیتر بالا و تقویتکنندههایی مانند آلبومین است.
نقش در شناسایی گروه O بمبئی
گروه خونی O بمبئی (Oh) یکی از نادرترین گروهها است که به دلیل جهش در ژن FUT1 فاقد آنتیژن H است. بدون H، آنتیژنهای A و B نیز بیان نمیشوند، حتی اگر ژنهای مربوطه حضور داشته باشند. در تست استاندارد با آنتیبادیهای ضد A و ضد B، این گروه هیچ واکنشی نشان نمیدهد و ممکن است بهعنوان گروه O تایپ شود. با این حال، حضور آنتیبادی ضد H در سرم این افراد (که بهطور طبیعی تولید میشود) و عدم واکنش با آنتیبادیهای ضد A و B، سرنخی برای تشخیص است. استفاده از آنتیبادی ضد H مکمل، همراه با آنتی A و آنتی B، برای تأیید این گروه ضروری است. کارشناسان آزمایشگاهی باید به این الگو توجه داشته باشند و تستهای تأییدی مانند آزمایش معکوس (واکنش مثبت در O Cell بکتایپ) را انجام دهند.
تشخیص زیرگروههای ضعیف ABO
زیرگروههای ضعیف ABO، مانند A3، Ax یا B ضعیف، به دلیل بیان کم آنتیژن یا تغییرات گلیکوزیلاسیونی، واکنشهای آگلوتیناسیون ضعیفی با آنتیبادیهای استاندارد نشان میدهند. برای مثال، در A3آگلوتیناسیون ممکن است به صورت مخلوط (Mixed-Field) ظاهر شود، در حالی که Ax ممکن است هیچ واکنشی نشان ندهد مگر با آنتیبادیهای بسیار حساس. آنتیبادیهای ضد A و ضد B با تیتر بالا و بهینهشده میتوانند این واریانتها را تشخیص دهند. استفاده از تکنیکهایی مانند انکوباسیون طولانیتر یا افزودن آنتیگلوبولین انسانی (AHG) نیز حساسیت را افزایش میدهد. این زیرگروهها اگر به اشتباه بهعنوان گروه O تایپ شوند، میتوانند در انتقال خون یا پیوند عضو مشکل ایجاد کنند.
چالشهای عملی در آزمایشگاه
- نتایج کاذب: آنتیبادیهایی با اختصاصیت پایین ممکن است با آنتیژنهای مشابه مانند H در مقابل A واکنش متقاطع داشته باشند و تشخیص را پیچیده کنند.
- حساسیت ناکافی: آنتیبادیهای با تیتر پایین ممکن است زیرگروههای ضعیف را از دست بدهند، بهویژه در نمونههای با حجم کم آنتیژن.
- تنوع ژنتیکی: تفاوتهای ژنتیکی در جمعیتها میتواند آنتیژنهایی با ساختار غیرمعمول تولید کند که با آنتیبادیهای استاندارد بهخوبی شناسایی نشوند.
- نیاز به تستهای تکمیلی: گروههای نادر اغلب نیازمند تستهایی مانند ژنوتایپینگ یا استفاده از معرفهای تخصصی هستند که ممکن است در همه آزمایشگاهها در دسترس نباشد.
پیشرفتها در طراحی آنتیبادیها
توسعه آنتیبادیهای مونوکلونال با حساسیت و اختصاصیت بالاتر، تشخیص گروههای خونی نادر را بهبود بخشیده است. برای مثال، آنتیبادیهای ضد A که به اپیتوپهای مشترک در تمام زیرگروههای A متصل میشوند، میتوانند احتمال خطا را کاهش دهند. همچنین، آنتیبادیهای نوترکیب که با استفاده از سیستمهای بیانی مانند سلولهای CHO تولید میشوند، پایداری و عملکرد بهتری دارند. فناوریهایی مانند نانوتکنولوژی نیز برای تقویت سیگنالدهی در تستهای سرولوژی به کار گرفته شدهاند، که بهویژه در تشخیص آنتیژنهای ضعیف مفید است.
کاربردهای بالینی و عملی
شناسایی دقیق گروههای خونی نادر با آنتیبادیهای ضد A و B در موارد زیر حیاتی است:
- انتقال خون: انتقال خون ناسازگار به افراد با گروه نادر میتواند واکنشهای همولیتیک شدید ایجاد کند.
- بارداری: مادران با گروه خونی نادر ممکن است آنتیبادیهایی تولید کنند که جنین را در معرض خطر بیماری همولیتیک قرار دهد.
- بانک خون: ذخیرهسازی واحدهای خونی نادر برای بیماران خاص نیازمند تایپینگ دقیق است.
کارشناسان آزمایشگاهی با استفاده از این آنتیبادیها و پروتکلهای مناسب، میتوانند این خطرات را مدیریت کنند.
راهکارهای عملی برای کارشناسان
- استفاده از پنلهای کنترلی: نمونههای شناختهشده با گروههای نادر برای تأیید عملکرد آنتیبادیها.
- تست بکتایپ: بررسی آنتیبادیهای موجود در سرم بیمار برای تشخیص ناسازگاری با تایپینگ مستقیم (سلتایپ)
- بهینهسازی شرایط: تنظیم دما، زمان انکوباسیون و استفاده از تقویتکنندهها برای افزایش حساسیت.
- همکاری با مراکز تخصصی: ارجاع نمونههای مشکوک به آزمایشگاههای مرجع برای ژنوتایپینگ.
نتیجهگیری
آنتیبادیهای ضد A و ضد B ابزارهای ضروری در شناسایی گروههای خونی نادر هستند که نقش مهمی در ایمنی انتقال خون و مدیریت شرایط بالینی ایفا میکنند. این آنتیبادیها باید حساسیت کافی برای تشخیص آنتیژنهای ضعیف و اختصاصیت لازم برای جلوگیری از واکنشهای متقاطع داشته باشند. گروههایی مانند O بمبئی و زیرگروههای ضعیف ABO چالشهایی را برای کارشناسان آزمایشگاهی ایجاد میکنند که با استفاده از آنتیبادیهای پیشرفته و پروتکلهای تکمیلی قابل حل هستند. پیشرفتهای بیوتکنولوژی، از تولید مونوکلونال تا طراحی نوترکیب، دقت و کارایی این معرفها را افزایش داده است.
منابع
- Anti-A and Anti-B in Rare Blood Group
- Rare Blood Groups and Serological Challenges
- ABO Subgroups and Antibody Sensitivity
- Bombay Phenotype Identification
- Weak ABO Variants and Antibody Performance
- Anti-H in Bombay Blood Group Typing
- Serological Detection of Rare Blood Groups
- Monoclonal Antibodies for ABO Typing
- Quality of Anti-A and Anti-B Reagents