نقد و بررسی

تست یک مرحله ای تشخیص آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری

تست تشخیص سریع آنتی ژن هلیکوباکترپیلوری برای تشخیص سریع و آنتی ژن هلیکوباکترپیلوری در مدفوع بوده و فقط برای استفاده توسط کاربر حرفه ای و تشخیص in vitro تهیه گردیده است.

هلیکوباکترپیلوری، باسیل گرم منفی مارپیچی و متحرک بوده که در سطح معده و داوزدهه وجود دارد. این باکتری یکی از علل مهم بیماری های گوارشی مانند التهاب مزمن معده، زخم معده و دوزادهه، پپنیک اولسر، گاستریت و بعضی از سرطان های گوارشی شناخته شده است؛ با این حال در برخی از بیماران بدون علائم کلینیکی میباشد.

هلیکوباکترپیلوری یک باکتری مسری میباشد و خیلی از تحقیقات نشان داده است که از دهان منتقل میشود، به این معنی که از راه غذا یا آب آلوده به مدفوع آلوده منتقل میشود. تست تشخیص آنتی ژن هلیکوباکترپیلوری در مدفوع همچنین میتواند جهت بررسی اثر بخش بودن درمان بیماری همزمان با تست تشخیص آنتی بادی هلیکوباکترپیلوری در سرم انجام گیرد.

آزمایش هلیکوباکتر پیلوری برای تشخیص عفونت هلیکوباکتر پیلوری استفاده میشود. این عفونت در معده و قسمت فوقانی روده کوچک صورت میگیرد. H.pylori می تواند باعث زخم معده شود. اما بیشتر افراد مبتلا به هلیکوباکترپیلوری در سیستم های گوارشی خود دچار زخم نمی شوند.تجزیه نمونه خون ممکن است شواهدی از عفونت فعال یا قبلی HP stool در فرد را نشان دهد. با این حال، آزمایش نفس و مدفوع در تشخیص عفونت های فعال Hp stool بهتر از آزمایش خون است.

پیشنهاد بررسی: TCA (50test) – AMP (50test) – BAR (50test) – BUP (50test) – BZO (50test)

میتوانید جهت اطلاعات بیشتر از قیمت و انواع محصول Vitrotec HP stool با کارشناسان پارس پیوند تماس حاصل فرمایید.

برای تشخیص H.pylori از چهار تست استفاده می شود:

• آزمایش آنتی بادی خون: آزمایش خون بررسی می کند که بدن شما آنتی بادی علیه باکتری های H.pylori ساخته است یا خیر. اگر آنتی بادی علیه H. pylori در خون خود دارید، نشان میدهدکه آلوده هستید یا در گذشته آلوده شده اید.
• آزمایش تنفس اوره: آزمایش تنفس اوره بررسی می کند که آیا در معده خود باکتری H.pylori دارید یا خیر. این آزمایش می تواند نشان دهد که آیا به عفونت H.pylori مبتلا هستید. همچنین می توان برای دیدن اینکه آیا درمان برای از بین بردن هلیکوباکتر پیلوری موثر بوده است یا خیر.
• آزمایش آنتی ژن مدفوع: آزمایش آنتی ژن مدفوع بررسی می کند که آیا موادی که سیستم ایمنی بدن را برای مقابله با عفونت H.pylori تحریک می کنند در مدفوع شما وجود دارند یا خیر. آزمایش آنتی ژن مدفوع ممکن است برای کمک به تشخیص عفونت هلیکوباکترپیلوری یا تشخیص موفقیت آمیز بودن درمان عفونت هلیکوباکترپیلوری انجام شود.
• نمونه برداری از معده: طی آندوسکوپی، یک نمونه کوچک (نمونه برداری) از پوشش معده و روده کوچک شما گرفته می شود. چندین آزمایش مختلف ممکن است روی نمونه بیوپسی انجام شود. برای کسب اطلاعات بیشتر، به عنوان مقاله آندوسکوپی دستگاه گوارش فوقانی مراجعه کنید.

تست تشخیص سریع آنتی ژن هلیکو باکترپیلوری (مدفوع) یک روش تشخیص کیفی بر پایه ایمونواسی جهت تشخیص آنتی ژن هلیکو باکتر در مدفوع میباشد. در این تست خط تست حاوی آنتی بادی ضد هلیکو باکترپیلوری میباشد. زمانی که نمونه به کیت اضافه میشود با ذراتی که با آنتی بادی ضد هلیکو باکتر پیلوری پوشیده شده واکنش داده و نمونه به وسیله خاصیت موئینگی در امتداد غشاء حرکت کرده تا با آنتی بادی ضد هلیکو باکترپیلوری موجود در تست واکنش دهد و یک خط رنگی تولید نماید. تشکیل خط رنگی در ناحیه تست نشان دهنده مثبت بودن جواب آزمایش میباشد در حالی که عدم تشکیل رنگ نشان دهنده منفی بودن جواب آزمایش میباشد. همیشه یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل C ظاهر میشود که نشان دهنده این است که حجم نمونه کافی بوده و به درستی جذب غشا شده است.

تست حاوی آنتی بادی مونوکلونال ضد هلیکو باکترپیلوری متصل به ذرات کلوئیدی و آنتی بادی بر علیه هلیکو باکترپیلوری کوت شده روی غشا میباشد.

1- فقط برای استفاده in vitro و کاربرد حرفه ای میباشد. بعد از گذشت تاریخ مصرف استفاده نشود.

2- تست باید تا قبل از استفاده در پوچ های در بسته باقی بماند.

3- در محل انجام آزمایش از خوردن، آشامیدن و سیگار کشیدن خودداری نمایید.

4- تمام نمونه ها باید خطرناک در نظر گرفته شوند و با آنها مثل عامل عفونی رفتار شود و در صورت آلودگی سطوح از محلول 0.5 یا 1 درصد سدیم هیپوکلریت جهت تمیز کردن سطوح آلوده استفاده نمایید.

5- در هنگام انجام آزمایش از روپوش آزمایشگاهی، دستکش یکبار مصرف و عینک محافظ استفاده کنید.

6- تست های استفاده شده باید مطابق با اصول ایمنی دفع گردند.

• پوچ ها در جعبه در دمای اتاق یا در دمای یخچال (2 تا 0 درجه سانتیگراد) نگهداری شود؛ تست را میتوان مطابق تاریخ مصرف درج شده روی پوچ یا برچسب روی جعبه در بسته نگهداری کرد.
• تست باید تا زمان مصرف درون بسته (پوچ) یا جعبه در بسته حاوی آن باقی بماند و نباید فریز شود.
• بعد از پایان تاریخ مصرف استفاده نشود.

*اجازه دهید تست و نمونه ها به دمای اتاق برسند.(15-30 ºC)

1- نمونه های مدفوع (1 تا 2 میلی لیتر یا 1 تا 2 گرم) را در ظرف تمیز و خشک جمع آوری نمایید. بهترین نتیجه زمانی به دست می آید که آزمایش بعد از جمع آوری نمونه انجام میشود. نمونه های در دمای 2-8 درجه سانتی گراد به مدت دو روز قابل نگهداری است. جهت نگهداری طولانی تر میتوان نمونه ها را در دمای منفی 20 درجه سانتی گراد تا یک سال نگهداری کرد.

2- پروسه آماده سازی نمونه

• نمونه مدفوع جامد

درب ظرف جمع آوری نمونه را باز نموده و اپلیکاتور موجود در بافر را حداقل در 3 قسمت مختلف نمونه مدفوع وارد کنید و بچرخانید و هر بار داخل ظرف حاوی بافر کرده و به خوبی مخلوط نمایید.

• نمونه مدفوع مایع

قطره چکان را به صورت عمودی در نمونه مدفوع قرار داده و حدود 80 میکرولیتر نمونه بردارید و در داخل بافر بریزید. میکروتیوپ محتوی نمونه و بافر را ورتکس کنید تا نمونه و بافر کاملا با هم مخلوط شوند.

3- پوچ تست را باز کرده و بلافاصله آزمایش را انجام دهید.

4- دو قطره ی پر از نمونه را (حدود 80 μL) روی قسمت S کاست ریخته و تایمر بزنید. از تشکیل حباب هوا در قسمت S جلوگیری نمایید.

5- پس از گذشت 10 دقیقه نتایج را تفسیر نمایید. نتایج نباید بعد از 20 دقیقه تفسیر گردد.

توجه: اگر نمونه توانایی حرکت بر روی غشا را ندارد، نمونه را سانتریفیوژ نموده و حدود 80 میکرولیتر از محلول رویی را برداشته و در روی قسمت S کاست ریخته و تایمر را بزنید.

مثبت: دو خطی رنگی مجزا ظاهر میشود و یک خط باید در ناحیه خط کنترل (C) و دیگری در ناحیه خط تست (T) باشد.

* شدت رنگی که در ناحیه تست (T) تشکیل میشود با توجه به غلظت آنتی بادی هلیکوباکترپیلوری متفاوت بوده، لذا سایه ای از رنگ که در ناحیه تست (T) تشکیل میشود هم باید مثبت در نظر گرفته شود.

منفی: یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل (C) ایجاد شده و هیچ خطی در ناحیه تست (T) به وجود نمی آید.

نامعتبر: نتیجه در صورتی نامعتبر است که هیچ خطی در ناحیه خط کنترل (C) ظاهر نشود، حتی اگر خطی در ناحیه خط تست به وجود بیاید.

1- تست تشخیص سریع آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری (مدفوع) صرفا برای استفاده  in vitro میباشد. این تست جهت اندازه گیری کیفی آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری در نمونه مدفوع مصرف میشود و هیچ استنباط کمی از عرض باندهای رنگی نباید حاصل گردد.

2- تست تشخیص سریع آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری صرفا نشان دهنده آنتی ژن هلیکوباکتر در نمونه بوده و نباید به عنوان تنها دلیل آلودگی به باکتری تفسیر شود.

3- به مانند همه تستهای تشخیصی، نتایج باید با هم یا با استفاده از اطلاعات کلینیکی و توسط پزشک تفسیر شود.

4- اگر نتیجه آزمایش منفی بود و علائم کلینیکی همچنان وجود داشت نیاز به استفاده از روش های دیگر تشخیصی میباشد.

5- به دنبال درمان آنتی بیوتیکی ممکن است میزان آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری از حد تشخیصی تست کمتر گردد، در این صورت تشخیص توسط تست با احتیاط صورت گیرد.

تست تشخیص سریع آنتی ژن هلیکو باکتر پیلوری (مدفوع) دارای حد تشخیص 8ng/ml میباشد که با روش های مبتنی بر آندوسکوپی مقایسه گردید که نشان دهنده دقت کلی 98.4% بود.

حساسیت

حد تشخیص: پس از کشت باکتری هلیکولاکتر پیلوری؛ سونیکیت و سانتریفیوژ انجام گرفت و پروتئین باکتری به دست آمد، این آنتی ژن رفرانس به دست آمده از باکتری با M 0.01 از بافر PBS-BSA رقیق گردید و با کیت تست گردید. محدوده تشخیصی تست 4-8 ng/ml میباشد.

اختصاصیت

بررسی ختصاصیت با مقایسه رپید تست تولیدی با یک کیت معتبر الایزا انجام گرفت که نشان دهنده میزان تطابق 95 درصد بود.

*احتمال تداخل HAMA و مقادیر بالای rf در نمونه های مدفوع بررسی نگردید.