نقد و بررسی

فایکول

فایکول یک محلول بدون رنگ و استریل آزمایشگاهی می باشد و از ترکیب فایکول و سدیم دیاتروزدات می باشد. که یک پلی ساکارید آب دوست خنثی، بسیار منشعب با جرم بالا است که به راحتی در محلول های آبی حل میشود. فیکول از واکنش پلی ساکارید با اپی کلروهیدرین تهیه می گردد.

فیکول بخشی از Ficoll-Paque است که در آزمایشگاه ها برای جداسازی خون از اجزای آن (گلبول های قرمز، لکوسیت ها و غیره) استفاده میگردد که معمولا در پایین یک لوله مخروطی قرار می گیرد و سپس خون به آرامی در بالای Ficoll-Paque قرار میگیرد.

در نتیجه محلول فایکول یک روش غیر اختصاصی برای جداسازی خون به اجزای آن است که در مطالعات زیست شناسی مولکولی و بیوشیمی مورد استفاده قرار میگیرد. فایکول به علت وجود دیاتریزوات سدیم به نور حساس می باشد و نباید این محلول را در برابر نور قرار دهید.

کاربرد

• جداسازی لنفوسیت های B ، T از خون محیطی مغز استخوان و خون بند ناف برای مطالعات آزمایشگاهی
• جدا سازی سلول های تک هسته ای (PBMC)

روش انجام آزمایش

جداسازی سلول های تک هسته ای خون محیطی با استفاده از فایکول و گرادیان شیب غلظت صورت می گیرد.

• نمونه خون مورد نظر خود را به یک لوله جمع آوری خون هپارین (ضد انعقاد) منتقل کرده و به آرامی مخلوط کنید.
• خون را به یک نسبت مساوی با PBMC رقیق کنید.
• محلول بالا بر روی فایکول به صورت دو لایه مجزا هم از هم قرار میگیرند بریزید و با دور 2500 به مدت 30 دقیقه سانتریفوژ کنید.

چگالی لیمفوسپ بیشتر از چگالی لنفوسیت ها و کمتر از چگالی اریتروسیت ها و گرانولوسیت ها می باشد. پس از سانترفیوژ کردن اریتروسیت ها و نوتروفیل از میان لیمفوسپ ها عبور کرده و در کف لوله قرار میگرند؛ در حالیکه در سطح مشترک پلاسمای غنی از سلولهای در سطح مشترک  PBMC از پلاکت و لیمفوسپ قرار میگیرند.

• سلول های تک هسته ای جدا شده با PBS شستشو داده میشوند.
• رسوب سلولی حاصله از محیط غنی شده PBMI را با 10% سرم و 1% آنتی بیوتیک (پنی سیلین استریتومایسن) به صورت سوسپانسیون در می آید.

پایداری و نگهداری محلول فایکول

محلول فایکول تا تاریخ درج شده بر روی ویال پایدار است؛ به شرط آن که دور از نور و در دمای 2-8 درجه سانتی گراد نگهداری شود.

محلول فایکول برند بهارافشان، محلولی آماده برای مصرف می باشد. همچنین استریل و عاری از اندوتوکسین است. 

بررسی پیشنهاد:  پلاسمای استریل خرگوش – محلول هنکس HBSS – پلیت CH50 – محلول پتاس KOH بدون حرارت – رنگ رایت گیمسا – محلول رنگ گیمسا

می توانید جهت دریافت اطلاعات خرید این محصول با کارشناسان پارس پیوند تماس حاصل فرمایید.

معرفی محلول فایکولنف:

شمارش سلول ها و گلبول های مختلف تا قبل ابداع فلوسایتومتری، بر مبنای جداسازی آنها قرار داشت. ساده ترین روش ها،افزودن دکستران به خون محیطی است. که با اتصال گلبول های قرمز به هم و ته نشین کردنشان با استفاده از سانتریفیوژ، باعث آزاد ماندن گلبول های سفید در قسمت رویی مجموعه می شود که دراین شرایط قابل جمع آوری بود.

در سال 1964، Byom با معرفی مخلوطی از جمع کننده که ترکیبات پلیمری بزرگی بود ، با ترکیبی از مواد دارای دانسیته خاص مجموعه ای مطرح کرد. این ترکیب می توانست گلبول های قرمز خون رقیق شده ای را که روی این مجموعه گسترده میشد جدا کند. در این روش نیز گلبول های سرخ ته نشین شده و گلبول های سفید در سطح مخلوط باقی می ماندند. این مجموعه بعدها توسط Thorsby و Bratile با تغییراتی چند در فرمولاسیون و روش برای جداسازی لنفوسیت ها در کشت سلول و تست هایی مانند Cytotoxicity تکمیل شد.