کیت معرف MR-VP

نقد و بررسی

کیت معرف MR-VP

کیت معرف MR-VP شامل متیل رد (MR) و 2 معرف برای تست ووگس پروسکار (VP) است. ایت تست به عنوان بخشی از آزمایش IMVIC استفاده می شود. محیط کشت MR-VP دارای ترکیبات پپتیک، دکستروز، دی پتاسیم فسفات می باشد و برای شناسایی با کتری های گرم منفی روده ای مورد استفاده قرار می گیرد و یک محیط کشت افتراقی می باشد.

آزمایش MR

برای تهیه : متیل رد ۰۴/۰ گرم + اتانول ۴۰ میلی لیتر + آب مقطر ۱۰۰ میلی لیتر متیل رد را در اتانول حل نموده و به حجم ۱۰۰ میلی لیتر می رسانیم. پس از انجام کشت و انکوباسیون ۳۷ درجه سانتی گراد به مدت ۴۸ ساعت، مقدار 0.6 میلی لیتر معرف رنگی متیل رد اضافه نموده و در صورت ظهور رنگ قرمز آزمایش MR مثبت می باشد. در صورت پیدایش رنگ نارنجی آزمایش MR مثبت ضعیف می باشد و در صورت عدم تغییر و پایداری رنگ زرد آزمایش MR منفی می باشد.

نتیجه: ظهور رنگ قرمز: آزمایش مثبت (PH=4/4) ظهور رنگ نارنجی: آزمایش مثبت ضعیف (PH=5/3) ظهور رنگ زرد: آزمایش منفی (PH=5/3)

متیل قرمز یا اسید بنزوئیک دی متیل آمینو-4-فنیلازو-2 ، که 4-دی متیل آمینوازوبنزن 2-اسید کربوکسیلیک نیز نامیده می شود ، از اتصال بین اسید آنترانیلیک و N ، N-دی متیلانیلین حاصل می شود. این ماده به دلیل حضور گروه SO3 محلول در آب می‌باشد. این ترکیب به هلیانتین نیز معروف است .

متیل قرمز همچنین کاربردهای دیگری دارد ، از جمله در تعیین اسپکتروفتومتری برم ، برای کنترل غلظت این هالوژن بسیار مفید است. لازم به ذکر است که برم در پسماندهای باقیمانده تولید شده توسط آزمایشگاههایی که مواد شیمیایی برای استفاده دارویی تولید می کنند وجود دارد.

آزمایش VP

معرف VP یک معرف دو قسمتی است. برای آزمایش VP، بعد از انکوباسیون به ازای هر یک میلی‌لیتر از محیط کشت، ۱۵ قطره محلول الکلی آلفا نفتول (محلول ۵ درصد در اتانول ۹۵%) و ۱۰ قطره پتاس (۴۰% در آب) اضافه می‌شود.

به لوله کشت داده شده و انکوبه شده حدود۶/۰ میلی لیتر معرف آلفا نفتول (معرف A) و مقدار ۲/۰ میلی لیتر محلول پتاس (معرف B) اضافه کرده و خوب تکان می دهیم. اگر تغییر رنگ صورت نگرفت آن را به مدت سی دقیقه به حال خود گذاشته و در صورتی که ظهور رنگ صورتی تا قرمز پدیدار شود، آزمایش VP مثبت و اگر تغییر رنگی صورت نپذیرد، آزمایش VP منفی خواهد بود.