نقد و بررسی
رنگ مالاشیت گرین 1%
مالاشیت گرین (Malachite green) با فرمول شیمیایی C23H25ClN2 (chloride) یک ترکیب آلی است؛ این ترکیب یک رنگ کاتیونی می باشد. مالاشیت گرین یکی از فراوردههای رنگی آنیلین است. سرطانزایی وتراتوژن بودن مالاشیت گرین در سالا 1991 توسط FDA تایید شد. از رنگ مالاشیت به طور سنتی به عنوان نوعی رنگ برای موادی مانند ابریشم، چرم و کاغذ استفاده می شود. این رنگ با وجود نامی که دارد، از ماده معدنی مالاشیت تهیه نشده است و این نام فقط از شباهت رنگی با آن گرفته شده است.
از روش رنگ آمیزی افتراقی Schaeffer-Fulton برای تمایز بین سلول های رویشی و اندوسپورها استفاده می شود. برای رنگ گیری اندوسپورها از یک رنگ اولیه (سبز مالاشیت) استفاده می شود. از آنجا که اندوسپورها در برابر رنگ آمیزی مقاومت می کنند، با افزایش حرارت، سبز مالاشیت به دیواره اسپور نفوذ می کند. در این تکنیک، گرمایش به عنوان دندانه یا شانه رنگ عمل می کند.
اسپور :
اسپور حالت مقاوم سلول باکتری است. بعضی از باکتریها در شرایط نامساعد محیط، قابلیت تشکیل سلول مقاوم از سلول رویشی را دارند. این سلول مقاوم چون در درون سلول رویشی تشکیل میشود به آن اندوسپور (Endospore) گفته میشود. وقتی که این فرم از سلول خارج میشود به آن اسپور میگویند. در اسپور متابولیسم سلول بسیار کند میشود. در صورت مساعد شدن شرایط محیطی، اسپور قادر است دوباره به فرم رویشی تبدیل شود. اسپور به دلیل داشتن پوششهای غیر قابل نفوذ در برابر شرایط نامساعد همچون خشکی، دمای نامناسب، نور، امواج رادیویی، مواد شیمیایی، انجماد و اشعهها مقاوم میباشد. اسپور نسبت به عوامل فیزیکی و شیمیایی مقاوم است و به آسانی رنگ را به خود نمیگیرد. به همین دلیل برای رنگآمیزی و نفوذ رنگ به داخل اسپور، به آن حرارت میدهند.
روش رنگآمیزی مالاشیت گرین:
- ابتدا یک گسترش از باکتری روی لام تهیه کرده و آن را فیکس می کنیم.
- سطح لام را با محلول مالاشیت گرین ۵% (سبز) پوشانده و لام را به مدت ۳ تا ۵ دقیقه حرارت میدهیم تا بخار متساعد شود اما رنگ نجوشد.
- لام را سرد کرده بعد با آب شستشو می دهیم.
- رنگ سافرانین (قرمز) را به گسترش اضافه کرده و می گذاریم ۳۰ ثانیه روی آن بماند.
- رنگ را خالی کرده و لام را می شوئیم .
- در آخر خشک شدن لام و مشاهده ی آن در زیر میکروسکوپ.
وقتی سلول ها زیر میکروسکوپ مشاهده می شوند، دارای سه ویژگی هستند:
- سلول های رویشی (سلول باکتری) صورتی / قرمز (رنگ ثانویه) قابل مشاهده هستند.
- سلول های رویشی (سلول باکتری) حاوی اندوسپورها باید صورتی رنگ شوند و هاگ یا اندوسپور باید به صورت بیضوی سبز درون سلول ها دیده شود.
- اندوسپورهای بالغ و آزاد نیز نباید با باکتری های رویشی در ارتباط باشند و باید به صورت بیضوی سبز دیده شوند.
نکته :
در رنگ آمیزی گرم و اسید فست از الکل یا اسید الکل یا اسید بعنوان ماده رنگ بر استفاده می شود اما در رنگ آمیزی مالشیت گرین، تنها آب کافیست. زیرا:
- رنگ سبز مالاشیت در آب محلول است و نیز اتصال محکمی به دیواره سلول رویشی ندارد.
- چون سلول های رویشی در اثر گرما مختل شدند سبز مالاشیت به راحتی از آن ها شستشو داده شود.
شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش مواد شیمیایی صنعتی و آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش محصولات میکروب شناسی با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد.
پیشنهاد بررسی: لوله وکیوم CBC K2, K3 لبویر – لوله لخته کلات بدون ژل(Clot Activator) لبویر – لوله وکیوم لخته ژل دار لبویر
برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی رنگ مالاشیت گرین 1% میر مدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.