نقد و بررسی

محیط کشت OF چیست ؟

محیط کشت OF که به اختصار محیط کشت OF نامیده می شود . این محیط کشت توسط هیو و لیفسون در سال 1953 ساخته شده است. محیط کشت OF آگار توانایی باکتری ها در اکسیداسیون یا تخمیر کربوهیدرات را بررسی می کند.  باکتری های تخمیر کننده در محیط، اسید تولید می کنند و باعث زرد شدن شناساگر بروموتیمول آبی رنگ می شود.

یکی از مهمترین خصوصیات افتراقی باکتری های گرم منفی غیر تخمیری از انتروباکتریاسه، توانایی ارگانیسم در استفاده از کروبوهیدرات هاست. در این محیط کشت مقدار کمتری آگار و همچنین پپتون نسبت به سایر محیط های کشت جامد به کار رفته است.

کاهش میزان پروتئین، تولید آمین های قلیایی را که مقادیر اندک اسید ناشی از اکسیداسیون قند را خنثی می کنند، کاهش داده و در نتیجه تولید مقدار کم اسید نیز مشخص می شود. همچنین با افزایش نسبی میزان قند محیط کشت OF مقدار اسید حاصل از اکسیداسیون افزایش می یابد. در محیط کشت OF قدرت تحرک باکتری نیز مشخص می گردد.

گزارش کار محیط کشت OF

میکروارگانیسم های ساکارولیتیک گلوکز را تخمیر یا اکسیداتیو می کنند. محصولات نهایی تخمیر شده  اسیدهای مخلوط نسبتاً قوی هستند که می توانند در یک محیط آزمایش تخمیر معمولی شناسایی شوند. اما  با این حال اسیدهای تشکیل شده در تخریب اکسیداتیو گلوکز بسیار ضعیف و کمتر هستند و برای تشخیص محیط تخمیر اکسیداسیون حساس تر از محیط Hugh و Leifson’s OF مورد نیاز است.

آزمون of مشخص می کند که باکتری های گرم منفی خاصی گلوکز را با تخمیر یا تنفس هوازی متابولیزه می کنند. در طی فرآیند غیر  هوازی تخمیر پیروات بسته به نوع تخمیر به انواع اسیدهای مخلوط تبدیل می شود.

غلظت بالای اسید تولید شده در طی فرآیند تخمیر  نشانگر آبی برومیتمول را در محیط OF از سبز به زرد در وجود یا عدم وجود اکسیژن تبدیل می کند. برخی از باکتری های گرم منفی غیرتخمیرکننده گلوکز را با استفاده از تنفس هوازی متابولیزه می کنند و فقط مقدار کمی اسید ضعیف در طول گلیکولیز و چرخه کربس تولید می کنند. کاهش میزان پپتون و افزایش مقدار گلوکز تشخیص اسیدهای ضعیف تولید شده را تسهیل می کند.

OF-Basal-Medium-1

محیط کشت OF Basal Medium حاوی :

• سدیم کلراید
• دی پتاسیم فسفات
• پپتون
• معرف آبی بروموتیمول
• آگار
• گلوکز
• آب

روش ساخت محیط کشت OF

ابتدا  pH باید به 7.1 تنظیم شود. سپس محیط را در 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو می کنیم.یک محلول استریل شده فیلتر از محلول 10٪ کربوهیدرات بصورت اسپتیک به محیط اضافه کنید تا غلظت نهایی 1٪ برسد. برای کشت بر روی این محیط از دو لوله استفاده می شود.

ارگانیسم جدا شده را در هر دو محیط تلقیح کرده. و سپس یکی از محیط ها را با پارافین استریل پوشانده که شرایط بی هوازی ایجاد شود.

بعد از انکوباسیون در لوله هایی که رنگ زرد ایجاد شده، اسید تولید و گلوکز مصرف شده است. در لوله واجد پارافین (شرایط بی هوازی) عمل تخمیر و در لوله ی فاقد پارافین (شرایط هوازی) عمل اکسیداسیون صورت می گیرد. اگر گلوکز محیط مصرف شود، اسید تولید می شود و برموتیمول بلو از حالت سبز به زرد تغییر رنگ می دهد.

• اگر هر دو لوله (با یا بدون روغن) زرد شود، میکروارگانیسم بی هوازی اختیاری می باشد، یعنی توانایی استفاده از گلوکز را در حضور یا عدم حضور اکسیژن دارد.
• در صورتی که فقط در لوله بدون روغن رنگ زرد ایجاد شود، باکتری هوازی است و توانایی استفاده از گلوکز را تنها در حضور اکسیژن دارا می باشند.
• عدم تغییر رنگ در لوله نشانه این است که میکروارگانیسم قادر به مصرف گلوکز نمی باشد.

خرید محیط کشتOF Basal Medium میرمدیا

شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش مواد شیمیایی صنعتی و آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش محیط کشت های میکروب شناسی با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد.

برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی محیط کشت OF میرمدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.

بررسی پیشنهاد : مانیتول سالت آگار – محیط کشت مالاشیت گرین – محیط کشت مک کانکی براث – مولرهینتون آگار – سوش ای کولای ۲۵۹۲۲ – محیط گزیلوز – محیط EMB – تایوگلیکولات براث – فنیل آلانین (۵۰۰gr) – (TSB (100gr