نقد و بررسی
معرف اوره 40%
معرف اوره 40% به عنوان معرف در محیط کشت اوره آز در آزمایشگاه استفاده میشود.
اوره یا کاربامید یک ترکیب آلی سخت و بی رنگ است که دارای دو گروه آمین اتصال یافته به یک گروه کربونیل است. اوره در متابولیسم ترکیبات حاوی نیتروژن در بدن حیوانات نقش مهمی ایفا می کند. اوره در بدن بسیاری از موجودات زنده، به عنوان قسمتی از سیکل یا چرخه اوره، از اکسیداسیون اسیدهای آمینه یا آمونیاک تولید میشود. تولید اوره در کبد اتفاق میافتد و توسط ان استیل گلوتامات تنظیم میشود. اوره به شکل محلول در خون یافت میشود . و توسط کلیهها به عنوان جزئی از ادرار دفع میگردد.
بیش از 90% تولید اوره در دنیا، به منظور استفاده به عنوان کودهای شیمیایی حاوی نیتروژن است. در کاربردهای عمومی، اوره دارای بالاترین مقدار ازت در میان تمامی کودهای جامد نیتروژنی می باشد. در صنایع شیمیایی اوره ماده اولیه برای تولید بسیاری از ترکیبات شیمیایی مهم است.
خصوصیات معرف اوره 40% آزمایشگاهی
- اوره نه خاصیت اسیدی دارد و نه خاصیت قلیایی
- این ترکیب به شدت محلول در آب است.
- و تقریباً غیرسمی می باشد.
آنزیم اوره آز
برخی باکتری های آنزیمی به نام اوره آز (urease) تولید می کنند که قادر است ترکیبات آمیدی نظیر اوره را تجزیه نموده و آن را به آمونیاک، دی اکسید کربن و آب هیدرولیز کند.در خانواده انتروباکتریاسه از میان باکتری های لاکتوز منفی تعدادی از آنها از جمله گونههای پروتئوس، کلبسیلا، برخی از گونههای سیتروباکتر، برخی از گونههای هموفیلوس، مخمر کریپتوکوکوس نئوفورمانس و چندین باکتری و قارچ دیگر به دلیل فعالیت اوره آز (Urease Activity) از باکتری های دیگر این گروه نظیر سالمونلا و شیگلا قابل افتراق هستند. فعالیت اوره آز باکتری ها را می توان با کشت باکتری در محیط حاوی اوره و با کمک معرف فنل رد بررسی نمود.
این آزمایش را میتوان جهت غربالگری کلنیهای لاکتوز منفی که در نتیجه کشت مدفوع بر روی محیطهای افتراقی رشد نمودهاند استفاده کرد. باید توجه نمود که یرسینیا انتروکولیتیکا که یک پاتوژن مدفوعی است اورهآز مثبت میباشد.به دنبال هیدرولیز اوره و تجمع آمونیاک PH محیط قلیایی می شود. بالا رفتن PH موجب تغییر رنگ معرف می شود.محصول نهائی قلیائی سبب تغییر رنگ معرف فنل رد (Phenol red) از زرد به صورتی یا قرمز میشود.
عدم مشاهده رنگ صورتی پررنگ یا ارغوانی نشانه منفی شدن تست اوره آز است. معرفهای تجاری جهت انجام آزمایش اورهآز سریع در دسترس بوده و به صورت دیسک یا سوابهای آغشته به معرف میباشند. سواب را به کلنی آغشته نموده و تغییر رنگ آن نشانه واکنش مثبت میباشد.
روش انجام آزمایش
برای انجام تست اوره از از Urea Broth استفاده می شود. باکتری مورد آزمایش در شرایط استریل به محیط کشت مایع تلقیح شده و به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد نگهداری می شود. سپس لوله های کشت از نظر هیدرولیز اوره مورد بررسی قرار می گیرند.
روش تهیه آبگوشت اوره
ترکیبات زیر را با هم مخلوط نموده و در لولههای در پیچدار کوچک یا لولههای در پیچدار بوروسیلیکات در مقادیر 5/0 میلی لیتر تقسیم می کنیم. این معرف به مدت 6 ماه پایدار میماند.
- عصاره مخمر 1/0 گرم
- مونوپتاسیم فسفات 091/0 گرم
- دی سدیم فسفات 095/0 گرم
- اوره 20 گرم
- فنل رد 01/0 گرم
- آب مقطر 1000 میلی لیتر
مقدار زیادی از ارگانیسم را به لوله حاوی آبگوشت اوره تلقیح می کنیم. لوله را در 35 درجه سانتیگراد انکوبه نموده و به مدت 15، 30، 60 دقیقه تا چهار ساعت از نظر تغییر رنگ به صورتی یا قرمز مشاهده نمائید.
نتیجه
ارگانیسمهای اورهآز مثبت (گونههای پروتئوس) موجب تغییر رنگ به رنگ صورتی روشن یا قرمز میشوند. اما ارگانیسمهای اورهآز منفی (اشریشیا کلای) تغییر رنگ را ایجاد نمینمایند.
نکات مهم در حین انجام آزمایش
- پروتئوس میرابیلیس یکی از عوامل مهم عفونت ادراری در انسان می باشد.
- تست اوره آز جهت شناسایی گونه های مهمی نظیر کورینه باکتریوم اوره آلیتیکوم، هلیکوباکترپیلوری، تشخیص مخمر های کپسول دار و به عنوان یک تست اضافی برای تشخیص بعضی کوکوباسیل های گرم منفی به کار می رود.
- تعدادی از باکتری اوره را با تاٴخیر هیدرولیز می کنند و برای بررسی واکنش تاٴخیری این باکتری ها، دوره انکوباسیون بیش از ۴۸ ساعت مورد نیاز است.
- در روش براث بافرهائی به کار رفتهاند که تغییرات pH را کنترل نموده و واکنش را سرعت میبخشند.
شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش مواد شیمیایی صنعتی و آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش معرف اوره 40% میر مدیا با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد.
برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی معرف اوره 40% میر مدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.
بررسی پیشنهاد : عصاره مخمر آگار – XLD آگار – ویولت رد بایل گلوکز آگار – محیط VRB آگار – محیط کشت اوره (پایه) آگار – BHI آگار کوندا – آگاروس E کوندا – آلکالن پپتون واتر کوندا – محیط کشت تایو – کیت رنگ آمیزی گرم – کیت رنگ آمیزی زیل نلسون
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.