نقد و بررسی

محیط بروسلا آگار (پایه)

محیط بروسلا آگار (پایه)، یک محیط کشت برای کشت ارگانیسم های بروسلا است. بروسلاها باکتری‌های گرم منفی، کوچک، هوازی و ثابتی می‌باشند. گونه‌های بروسلا در محیط کشت جامد، معمولاً به صورت کلنی‌های صاف، شفاف، آبی متمایل به سفید تا کهربائی، رشد می‌کنند.

اما رشد بروسلا کنیس و بروسلا اوویس، به صورت کلنی‌های خشن و گاهی موکوئیدی است. بروسلا اولین بار در سال ۱۸۸۷ توسط بروس از طحال سربازان انگلیسی که در جزیره مالت مرده بودند، کشف شده است و باعث بیماری بروسلوز (کیت رزبنگال) یا تب مالت می شود.

این گونه باکتری ها، انگل های داخل سلولی است که سبب سقط جنین در حیوانات و بیماری تب مایع سپتی سمی یا عفونت های موضعی استخوان، بافت یا سیستم اندام در انسان می شود.

گونه های بروسلا بسیار عفونی هستند و بنابراین باید هنگام کشت بسیار مراقبت شود. این گونه های بروسلا بسیار سخت پسند هستند؛ بنابراین به یک محیط غنی از مواد مغذی نیاز دارند تا بتوانند رشد کنند.

این محیط برای کشت گونه های بروسلا از نمونه های تشخیصی مانند خون، مواد غذایی و… به کار می رود. محیط کشت بروسلا آگار با افزودن ۵% خون اسب، برای روش های کیفی جداسازی و کشت میکرو ارگانیسم های هوازی و بی هوازی از جمله استرپتوکوک، پنوموکوک، لیستریا، نایسریا مننژیتیدیس و هموفیلوس آنفلوانزا از نمونه های بالینی و غیر بالینی استفاده می شود.

این محیط کشت مورد تایید استاندارد های = EP, ISO, DIN, USP, USDA است. و ظاهر این محیط کشت:

• ظاهر پودر: کرم رنگ، یکدست و پودری
• ظاهر محیط آماده: کرم- قهوه ای و شفاف

ترکیبات :

• Pancreatic Digest of Casein
• Peptic Digest of Animal Tissue
• عصاره مخمر
• سدیم کلرید
• دکستروز
• سدیم بیسولفیت
• آگار

پپتون گوشت و کازئین پپتون نیتروژن آلی را برای محیط فراهم می کند.

عصاره مخمر یک منبع قوی ویتامین B است. دکستروز هم منبع انرژی است. سدیم بیسولفیت یک عامل کاهنده است. سدیم کلرید تعادل اسمزی را حفظ می کند. این محیط کشت را می ­توان با افزودن خون دفیبرینه اسب غنی کرد. با افزودن پلی میکسین، باسیتراسین، سیکلو هگزامید و اتیل ویوله می­ توان از رشد میکروب­ های فلور جلوگیری کرد.

محیط کشت افتراقی با اضافه کردن رنگ­ های تیونین و فوشین به محیط کشت Brucella Agar ساخته می شود. گونه­ های متفاوت بروسلا به وسیله حساسیت شان به این دو ترکیب از یکدیگر تشخیص داده می­ شوند.

طرز تهیه محیط کشت بروسلا آگار پایه :

1. 42 گرم از محیط کشت Brucella Agar  را در یک لیتر آب مقطر یا تصفیه شده مخلوط می کنیم.
   
2. با هم زدن بر روی حرارت می گذاریم به مدت یک دقیقه بجوشد تا پودر کاملا حل شود.
3. با اتوکلاو کردن در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه استریل می کنیم.
4. آن را تا دمای ۴۵-۵۰ درجه سانتی گراد خنک کرده و در صورت نیاز به آن ۵ تا ۱۰ درصد خون دفیبرینه استریل اضافه می کنیم.
5. داخل صفحات استریل پتری دیش توزیع می کنیم.
   
6. برای بدست آوردن کلنی های جدا شده از نمونه ها از روش های استاندارد استفاده می کنیم.
7. برای کشت اولیه، پلیت ها را در دمای 35 ± 2 درجه سانتیگراد به مدت 24-72 ساعت را در فضای حاوی ده درصد CO2 انکوبه می کنیم. (چون بسیاری از عوامل بیماری زا در جداسازی اولیه به CO2 نیاز دارند). اگر پس از این مدت رشدی دیده نشود، دوره انکوبه را تا 21 روز ادامه می دهیم.

برای تهیه ی محیط کشت افتراقی، مقدار 1 میلی لیتر محلول 1% تیونین یا فوشین بازی را به آن اضافه می کنیم. (توجه: محلول های فوق را قبل از افزودن به محیط، به مدت 20 دقیقه در بن ماری آب جوش حرارت می دهیم). محیط کشت را استریل کرده و به دمای 45-50 درجه می رسانیم. سپس یک ویال از مکمل brucella selective supplement را در 5 میلی لیتر آب مقطر حل کرده و فیلتر استریل می کنیم؛ و به نیم لیتر محیط اضافه می کنیم.

محدودیت های محیط کشت بروسلا آگار :

• برای استفاده در تشخیص بیماری یا سایر شرایط در انسان به کار نمی رود
  
• به دلیل تنوع تغذیه ای، محتمل است برخی از سویه ها رشد ضعیفی داشته باشند یا در این محیط رشد نکنند.
• تمام موجودات بی هوازی احتمالی باید توسط آزمایش تأیید شناسایی شوند.

خرید محیط بروسلا آگار میرمدیا :

شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش تجهیزات، اقلام مصرفی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش محیط های کشت میکروب شناسی با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد. برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی محیط کشت بروسلا آگار میرمدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.

بررسی پیشنهاد :محیط کشت کوک میت – محیط کورن میل آگار – محیط سیستین تریپتون آگار – محیط DNAse آگار – محیط کشت OF – محیط TSB – DNAse آگار (۵۰۰gr) – (EMB (100gr – بلاد آگار (۵۰۰gr)