نقد و بررسی

محیط DNAse – سه خانه

از محیط DNase برای تشخیص و افتراق باکتری ها در موارد مواجهه با کوکسی گرم مثبت کاتالاز مثبت و باسیل گرم منفی استفاده می شود. 

اساس آزمایش DNase:

این آزمایش با هدف تشخیص باکتری های DNase مثبت محیط کشت در ارزیابی فعالیت دزوکسی ریبونوکلئاز (DNase) باکتری ها و قارچ ها و خصوصا به عنوان کمک در تشخیص استافیلوکوک های بیماری زا به کار می رود.
DNase Test Agar With Toluiden blue برای کمک به تفکیک و تشخیص گونه سراشیای بدون پیگمان که ممکن است به اشتباه به عنوان گونه انتروباکتر و کلبسیلا تشخیص داده شوند، به کار می رود.

اگر استافیلوکوک آنزیم DNase داشته باشد این آنزیم، اسید نوکلئیک را هیدرولیز می نماید که با استفاده از معرف و ایجاد هاله شفاف در اطراف محل رشد باکتری می توان به این موضوع پی برد.

ویژگی های آزمایش:

• حساسیت: ۹۹٪ استافیلوکوک های کواگولاز مثبت، DNase مثبت نیز هستند.
• اختصاصیت: ۲۰٪ استافیلوکوک های کواگولاز منفی، DNase مثبت هستند.
  محیط مناسب برای برداشتن کلنی پلیت های LEMB Agar یا Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood حاوی ارگانیسم مورد نظر می باشد.
  از پلیت بلاد آگار برای استافیلوکوک ها و بلاد آگار یا مک کانکی برای نمونه های گرم منفی استفاده می کنیم.

تجهیزات و مواد مورد نیاز تست:
معرف اسید کلریدریک 1N (یک نرمال) یا معرف تولوئیدین بلو

محیط کشت DNase دارواش

مراحل اجرایی کار:

پلیت های DNase Test Agar یا DNase Agar with Toluidine Blue را با نمونه مورد نظر به صورت نقطه ای (یا خطی) تلقیح نمایید.
پلیت ها را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در دمای ۲ + ۳۵ سانتی گراد انکوبه نمایید.
پس از انکوباسیون، روی پلیت های DNase Test Agar ساده، اسید کلریدریک ۱ نرمال و یا تولوئیدین بلو
۰.۱٪ بریزید به گونه ای که سطح پلیت را کاملا بپوشاند و سپس آن را بر روی زمینه تیره قرار داده و بررسی نمایید.
تلقیح باید نقطه ای باشد، چون بعضی از سویه های استافیلوکوک اورئوس به خوبی بر روی محیط، رشد نمی کنند و در نتیجه میزان رشد برای ارزیابی فعالیت DNase کافی نخواهد بود. در صورت تلقیح نقطه ای، حتی اگر در محل تلقیح، رشدی ایجاد نشود می توان فعالیت DNase را ارزیابی نمود.

تفسیر نتیجه: 

DNase Test Agar که اسید کلریدریک یک نرمال روی آن ریخته شده است:
الف) نتیجه مثبت : فورا هاله های شفاف کاملا مشخصی اطراف کلنی یا محل تلقیح را در محیط کشت احاطه می کنند.
ب) نتیجه منفی : اطراف کلنی ها یا محل تلقیح شفاف نمی شود.

برای خرید و دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی محیط DNAse سه خانه دارواش با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.

پیشنهاد بررسی : محیط کشت هکتون سه خانه – محیط کشت مکانکی 8 سانت – محیط مک کانکی/ XLD – محیط بلادآگار سه خانه – محیط ژلاتیناز – محیط XLD – محیط کشت آرابینوز – محیط SS آگار 3 خانه – محیط XLD هشت سانت