نقد و بررسی

محیط TSI آگار (Triple Sugar Iron Agar) چیست ؟

محیط TSI آگار به دلیل توانایی میکروارگانیسم ها برای تخمیر قند و تولید سولفید هیدروژن استفاده میشود. تست (TSI) یک آزمایش میکروبیولوژیکی است. این تست اغلب برای تمایز باکتری های روده ای از جمله سالمونلا و شیگلا استفاده می شود. بیشتر باکتری ها دارای توانایی تخمیر کربوهیدرات ها، به ویژه قند هاند. هر باکتری تنها می تواند بخشی از قندها را تخمیر کند، در حالی که دیگری نمی تواند آن را تخمیر کند. بنابراین، قندهایی که یک باکتری می تواند باعث تخمیر و یا عدم تخمیر ان شود ویژگی مشخصی از باکتری ها را نشان میدهد .که معیار مهمی برای شناسایی آنها است.

ترکیبات:

شیب TSI یک لوله آزمایش حاوی آگار است. که حاوی: یک رنگ حساس به pH (فنول رد)، 1٪ لاکتوز، 1٪ ساکارز، 0.1٪ گلوکز و تیو سولفات سدیم و سولفات آهن یا سولفات آهن آمونیوم است.(در محیط کشت TSI جامد غلظلت لاکتوز و ساکارز ده برابر گلوکز است). همه این مواد با هم ترکیب می شوند و توسط حرارت استریل می گردند . نهایتا لوله حاوی محیط به صورت slant قرار می گیرد تا محتویات داخل آن سفت شود. و محیط کشتی دارای عمق و سطح شیبدار به دست آید. به دلیل شکل مورب محیط می توان ب روی آن هم باکتری های هوازی و هم باکتری های بی هوازی را کشت داد.(این محیط درجات متفاوتی از اکسیژن را فراهم می کند). محیط TSI agar بر پایه محیط Kligler’s iron agar ساخته شده است. ولی به آن یک قند ساکارز نیز اضافه شده است تا بتوان باکتری های تخمیر کننده ساکارز را نیز مورد بررسی قرار داد.

کاربردهای محیط کشت TSI

• تشخیص تخمیر لاکتوز
• تشخیص تولید گاز
• تشخیص گونه های باکتریاسه و سایر باکتری ها

واکنش های مختلف در TSI

در صورت تخمیر هر کدام از قندهای محیط TSI، محیط اسیدی می شود. و شناساگر فنل رد موجود در محیط باعث تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد می شود. در شرایطی که قند موجود در محیط تمام شود؛ باکتری های هوازی شروع به مصرف پپتید می کنند. و محیط قلیایی ایجاد می شود و دوباره رنگ محیط به زرد بر می گردد. در محیط کشت TSI می توان تولید گاز هیدروژن سولفید و یا سایر گاز ها را نیز بررسی کرد. تیوسولفات سدیم و سولفات آمونیوم آهن موجود در محیط تولید سولفید هیدروژن را تشخیص می دهند. با رنگ سیاه در انتها لوله نشان داده میشود.

در شرایط بی هوازی (در قسمت پایین لوله) برخی از باکتری ها از تیول سولفات به عنوان گیرنده الکترون استفاده می کنند و آن را به گاز هیدروژن کاهش می دهند. این گاز ممکن است به صورت حباب هایی در طول مسیر تلقیح باقی بماند. تولید هیدروژن ممکن است آگار را از قسمت انتهایی لوله بلند کرده و یا محیط را بشکند. (آگار ترک بخورد). CO2 در صورت تولید ممکن است به صورت حباب نشان داده نشود؛ زیرا در محیط محلول است.

تفسیر نتایج :

باکتری هایی که هر یک از سه قند موجود در محیط را تخمیر می کنند، محصولات فرعی تولید می کنند. این محصولات فرعی باعث تغییر رنگ فنول رد از قرمز به زرد می شوند. موقعیت تغییر رنگ محیط؛ تخمیر گلوکز را از لاکتوز یا ساکارز متمایز می کند. بسیاری از باکتری هایی که می توانند قندهای موجود در ته بی هوازی لوله را تخمیر کنند، انتروباکتری هستند.

بعضی از باکتری ها از آنیون تیو سولفات به عنوان یک گیرنده الکترون انتهایی استفاده می کنند و آن را به سولفید تبدیل می کنند. در اینصورت، H₂Sتشکیل شده با سولفات آهن در محیط واکنش داده و سولفید آهن تشکیل می دهد که به صورت رسوب سیاه در انتهای محیط لوله قابل مشاهده است. باکتری های تولید کننده سولفید مثل گونه های سالمونلا، پروتئوس، سیتروباکتر و ادواردزیلا.

باکتری هایی که توانایی تخمیر کردن لاکتوز را ندارند، از گلوکز استفاده می کنند. این باکتری ها در ابتدا پس از گذشت حدود 8 ساعت باعث ایجاد یک سطح شیبدار زرد / انتهای لوله زرد می شوند. (واکنش اسید / اسید). اما پس از 24 ساعت به واکنش به صورت به سطح شیبدار قرمز / زرد تبدیل می شود. (واکنش قلیایی / اسیدی). 

اگر باکتری هم لاکتوز و هم گلوکز را تخمیر کند، لوله به صورت زرد / زرد در می آید. به دلیل مقدار زیادی اسید تولید شده در واکنش، به همان شکل باقی می ماند. سیاه شدن کف لوله در اثر تولید H₂S ممکن است واکنش اسیدی (زرد) در ته لوله را مخفی کند. Salmonella enterica serovar Typhi ممکن است منجر به سیاه شدن محیط هم در سطح شیبدار و هم در انتهای لوله شود.

خرید محیط کشت TSI

شرکت پارس پیوند فعال در زمینه فروش مواد شیمیایی صنعتی و آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در حوزه فروش محیط های کشت میکروبی با کیفیت عالی، قیمت مناسب و در مقادیر دلخواه به مشتریان می باشد.

برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره ی محیط TSI آگار میرمدیا با کارشناسان پارس پیوند تماس بگیرید.

پیشنهاد بررسی : رنگ رتیکولوسیت – محلول کلسیم کلرید – کیت معرف MR-VP – استاندارد ۰.۵ مک فارلند – مولر هینتون براث کوندا – مانیتول سالت آگار کوندا – کلیگر ایرون آگار کوندا – سرم اسب ۵۰ سی سی – رنگ گیمسا – رنگ رایت گیمسا