نقد و بررسی

کیت CK-MB

کیت CK-MB در آزمایش جهت اندازه گیری فعالیت CKMB در سرم انسان بـه روش دستـی و دستگاهی می باشد.

اهمیت کلینیکی

در 50 درصد بیماران مبتلا به AMI ، چهارساعت پس از شروع حمله مقدار انزیم های قلبی، خصوصاً CK افزایش می یابد.

در اندازه گیری مقدار MB-CK دقت تشخیص از 95 درصد فراتر می رود و از آنجا که مقدار MB-CK ظرف 48 ساعت پس از حمله کاهش می یابد با کمک کیت CK-MB می توان مقدار CK-MB را اندازه گیری در موارد عود AMI تشخیص داد، در حالی که تروپونین ها از این نظر از اهمیت زیادی برخوردار نیستند.

وقتی بیماری با درد سینه شدید مراجعه می کند در جایگاه اول تست تروپونین را انجام داد که اختصاصی تر از آنزیم های دیگر قلب عمل می کند و اگر مثبت بود تست MB-CK به عنوان تائید و بستری شدن شخص تعیین کننده است.

روش Immunoinhibition

اساس روش: در این تست اندازه گیری فعالیت CKدر حضور آنتی بادی CK-M انجام می گیرد.
این آنتی بادی تمام فعالیت های ایزو آنزیم CK-MM و نیمی از CK-MB را مهار ولی تاثیری در زیر واحد B مربوط به CK-BB ندارد.

به عبارت دیگر با این روش فعالیت CK-B اندازه گیری شده و جواب به دست آمده ×2 می شود تا فعالیت CKMB تعیین شود.

معرف ها

Storage	Control	Presentation
2-8°C	2*5 ml	R1: CKMB Enzyme Mix
2-8°C	1*25 ml	R2: CKMB Substrate

شرایط نگهداری

معرف ها در دمای 2-8 درجه سانتیگراد و تا تاریخ انقضاء مندرج بر روی ویال ها پایدار می باشند. مشروط برای اینکه درب آنها بسته و آلوده نگردند. پس از باز شدن ظرف مدت 3-4 هفته مصرف شود. از یخ زدن، آلوده نمودن و نیز مجاورت در مقابل نور جلوگیری شود.

آماده سازی

جهت آماده سازی کیت های کنترل کراتین کیناز MB ابتدا درب یک ویال حاوی پودر لیوفیلیزه را باز نمایید.
به آن 1 سی سی آب مقطر دیونیزه اضافه کنید و تا حل شدن کامل پودر به آرامی آن را تکان دهید.
سپس 30 دقیقه صبر نمایید و پس از اطمینان از یکنواخت بودن محلول کرده و پس از حل شدن و یک نواختی کامل مورد استفاده قرار دهید.
برای مخلوط نمودن از حرکات سریع و تولید حباب در محلول خودداری نمایید. بعد از اضافه کردن آب مقطر، محلول را دور از نور نگهداری کنید.

محلول کار آماده مخصوص روش تک محلولی

4 قسمت از R1 را با یک قسمت R2 مخلوط نمائید این محلول به مدت 20 روز در دمای 2-8 درجه سانتیگراد و 48 ساعت در دمای اتاق 25-15 درجه سانتیگراد پایدار است. محلول را می بایست دور از نور نگهداری نمود و پس از استفاده سریعاً درب لوله ها را بسته و به یخچال انتقال داد. محلول کار آماده اگر در یک کووت 1 سانت و طول برج 340 نانومتر مقابل آب مقطر خوانده شود می بایست جذبی ≤ 0.70 داشته باشد.

یادداشت

می توان حجم محلول کار آماده ونمونه را به تناسب تغییر داد تا با هر نوع فتومتر یا آنالایزر قابل خوانش باشد.
ثبات دمای 73 درجه سانتیگراد،کالیبره بودن دستگاه و نیز زمان آزمایش در این تست بسیار مهم هستند.
تری گلیـسیریـد تا ،≤500mg/dl اسـید آسکـوربیک تا ،≤30mg/dl هـمـوگـلوبـیـن تا 00mg/dl و بیلی روبین تا ≤60mg/dl در این آزمایش تداخل ندارند.

نمونه مورد آزمایش : سرم تازه و شفاف بـدون همولیز

پلاسما توصیـه نمی شـود چـه ضـد انعقادهـای، EDTA هپارین، فلوراید و سیترات فعالیت آنـزیم CK را مهار می کنـد در مـورد بیمـاران مشکوک بـه AMI نمونـه سـرم 6، 12 و 24 ساعت می بایست اندازه گیری کرد. آزمایشات ساعت 24 و 12 بصورت دو پلیکیت انجام شود. پـایـداری CK در سرم یک روز در دمای 4 درجه سانتیگراد و به صورت طولانی سرم می بایست فریز شود.