نقد و بررسی

محلول تریپسین به طور معمول در حذف سلول‌های چسبنده از سطح کشت استفاده میشود. غلظت تریپسین لازم برای خارج نمودن سلول‌ها از بستر آن‌ها در درجه اول به نوع سلول و سن کشت بستگی دارد.

از محلول تریپسین-EDTA در جدا کردن سلولهای سرطانی روده بزرگ انسان HT29 کشت شده در RPMI 1640 که با 10٪ سرم گوساله جنین تکمیل شده بود در طول تعیین فراوانی سلول نسبی نمونه های با غلظت بالا برای آزمایش تریپسیناسیون سلول‌های tcA-201 کلیه جنینی انتقال یافته موقت استفاده می شود.

برای آزاد سازی آنزیمی سلول های فیبروبلاست موش (رده سلولی L929) متصل به داربست در طی کشت سلولی برای ارزیابی تأثیر چندین درمان اصلاح شده داربست و الیاف غیر بافتی پلی لاکتید (L / D) اصلاح شده .

ساختار

تریپسین از یک پلی پپتید تک زنجیره ای 223 اسید آمینه تشکیل شده است. این مولکول با حذف هگزاپپتید N ترمینال از تریپسینوژن تولید می شود که در پیوند پپتید Lys–lle شکسته می شود. توالی اسیدهای آمینه توسط 6 پل دی سولفید به طور متقاطع پیوند داده می شود. این شکل بومی تریپسین  بتا تریپسین است. بتا تریپسین می تواند اتولیز شود و در باقی مانده Lys-Ser شکسته شود و آلفا تریپسین تولید کند. تریپسین عضوی از خانواده سرین پروتئاز می باشد.

احتیاط محلول تریپسین

این محصول بین 10- و 40– درجه سانتیگراد به صورت منجمد نگهداری می شود. از منجمد و ذوب کردن مداوم آن باید خودداری شود.

آماده سازی محلول تریپسین

این محصول حاوی فنل قرمز است. به دلیل حمل و نقل روی یخ خشک ممکن است دی اکسید کربن قابل توجهی در بسته وجود داشته باشد. این CO2 ممکن است وارد محلول شود و PH را اندکی کاهش دهد و به جای نارنجی مایل به رنگ نارنجی باشد. محلول نارنجی همچنان برای استفاده مناسب خواهد بود  یا می توان PH را با هیدروکسید سدیم تنظیم کرد. انکوباسیون سلول با غلظت تریپسین بیش از حد برای مدت طولانی می تواند به غشای سلول آسیب برساند و سلول را از بین ببرد. محلول کردن تریپسین یا رقیق کردن آن از یک محلول غلیظ باید با یک محلول نمک بافر که فاقد +Ca2 یا +Mg2 انجام شود.