نقد و بررسی

محیط هیپورات برای انجام تست تشخیصی استرپتوکک های گروه B استفاده می شود. این باکتری با آنزیم هیپوریکاز (hyppuricase)، هیپورات محیط را هیدرولیز میکند.

از هیدرولیز سریع هیپورات سدیم، اسید بنزوئیک و گلیسین تولید میشود. گلیسین توسط یک عامل اکسید کننده‌ای به نام نین‌هیدرین، دآمینه و احیا می‌شود و تولید رنگ بنفش می‌کند. علاوه بر استرپتوکوک های بتاهمولیتیک گروه B ، گاردنرلاواژینالیس، گونه‌های لیستریا و برخی باکتری‌های دیگر نیز قادر به هیدرولیز هیپورات هستند.

روش آزمایش هیدرولیز هیپورات

محیط مورد استفاده برای آزمایش باید فقط حاوی هیپورات باشد. زیرا نین هیدرین ممکن است با سایر اسید آمینه های موجود در محیط کشت واکنش نشان دهد.

دو ماده فوق را مخلوط نموده و در لوله‌های آزمایش کوچک پلاستیکی یکبار مصرف (75×12) با در پیچ‌های فشاری به مقدار 4/0 میلی لیتر در هر لوله تقسیم نمائید. این محلول به صورت یخ زده تا 6 ماه پایدار است.

استون و بوتانول را با هم مخلوط نموده و سپس نین هیدرین را اضافه نمائید. محلول در شیشه قهوه ای رنگ با یک درپوش محکم حداکثر به مدت 6 ماه در درجه حرارت اتاق پایدار است.

از کلنی مورد نظر در لوله محیط هیپورات دارواش کشت دهید. سوسپانسیون باید شیری رنگ باشد. لوله را به مدت 2 ساعت در حمام آب 35 درجه سانتیگراد انکوبه نمائید. 2 /0 میلی لیتر از معرف نین هیدرین را به لوله اضافه نموده و به مدت 15 دقیقه دیگر لوله را انکوبه نمائید. در اثر هیدرولیز هیپورات رنگ قهوه ای تیره در لوله مشاهده می‌شود. این آزمایش را می‌توان جهت شناسائی سایر ارگانیسم‌ها نیز به کار برد.

با اضافه نمودن معرف نین هیدرین لوله حاوی کشت استرپتوکوک آگالاکتیه به صورت ارغوانی پر رنگ (مثبت) و لوله انتروکوک به صورت بی رنگ یا اندکی زرد مایل به صورتی (منفی) در می‌آید.