نقد و بررسی

محیط هیپورات برای انجام تست تشخیصی استرپتوکک های گروه B استفاده می شود. این باکتری با آنزیم هیپوریکاز (hyppuricase)، هیپورات محیط را هیدرولیز میکند.

از هیدرولیز سریع هیپورات سدیم، اسید بنزوئیک و گلیسین تولید میشود. گلیسین توسط یک عامل اکسید کننده‌ای به نام نین‌هیدرین، دآمینه و احیا می‌شود و تولید رنگ بنفش می‌کند. علاوه بر استرپتوكوك های بتاهموليتيک گروه B ، گاردنرلاواژيناليس، گونه‌هاي ليستريا و برخی باكتري‌های ديگر نیز قادر به هيدروليز هيپورات هستند.

روش آزمایش هیدرولیز هیپورات

محيط مورد استفاده برای آزمایش بايد فقط حاوی هيپورات باشد. زیرا نين هيدرين ممكن است با سایر اسيد آمينه های موجود در محيط كشت واكنش نشان دهد.

دو ماده فوق را مخلوط نموده و در لوله‌هاي آزمايش كوچك پلاستيكي يكبار مصرف (75×12) با در پيچ‌هاي فشاري به مقدار 4/0 ميلي ليتر در هر لوله تقسيم نمائيد. اين محلول به صورت يخ زده تا 6 ماه پايدار است.

استون و بوتانول را با هم مخلوط نموده و سپس نين هيدرين را اضافه نمائيد. محلول در شيشه قهوه اي رنگ با يك درپوش محكم حداكثر به مدت 6 ماه در درجه حرارت اتاق پايدار است.

 از کلنی مورد نظر در لوله محیط هیپورات دارواش كشت دهيد. سوسپانسيون بايد شيري رنگ باشد. لوله را به مدت 2 ساعت در حمام آب 35 درجه سانتيگراد انكوبه نمائيد.  2 /0 ميلي ليتر از معرف نين هيدرين را به لوله اضافه نموده و به مدت 15 دقيقه ديگر لوله را انكوبه نمائيد. در اثر هيدروليز هيپورات رنگ قهوه اي تيره در لوله مشاهده مي‌شود. اين آزمايش را مي‌توان جهت شناسائي ساير ارگانيسم‌ها نيز به كار برد.

با اضافه نمودن معرف نين هيدرين لوله حاوی كشت استرپتوكوك آگالاكتيه به صورت ارغواني پر رنگ (مثبت) و لوله انتروكوك به صورت بي رنگ يا اندكي زرد مايل به صورتي (منفي) در مي‌آيد.

كنترل كيفی

كنترل مثبت: استرپتوكوك آگالاكتيه (ATCC 27956)

كنترل منفي: انتروكوكوس فكاليس (ATCC 19433 )